روش تهیه محلول استاندارد 0.5 مک فارلند
محیط نیم مک فارلند محیطی در تست آنتی بیوگرام است که میزان کدر بودن نمونه خود را با ان مقایسه می کنیم . این محیط حاوی۱۰۸ × ۱.۵ باکتری است . نحوه تهیه این محیط در آزمایشگاه به شرح زیر است : برای تهیه کدورت0.5 مک فارلند ما 0.5 میلی لیتر کلرید باریم 0.48 مولار را در 99.5 میلی لیتر اسید سولفوریک0.36 نرمال مخلوط کردیم. که این محیط به مدت به مدت 6 ماه اگر در تاریکی و در ظرف دربسته قابل نگهداری است.اگر در هر زمان رسوبی در لوله مشاهده شود محیط غیر قابل استفاده خواهد بود.


آماده سازی سوسپانسیون میکروبی 5/0 مک فارلند
به کمک سواپ ازبالای 3 - 4 کلنی از بالای کلنی ها برداشته و در داخل یک لوله سرم فیزولوژی بصورت سوسپانسیون در آوردیم تا کدورتی به اندازه کدورت لوله مک فارلند به ما بدهد
بعد از ایزوله کردن باکتری ، مقداری از کلونی باکتری را به وسیله انس (نه لوپ) برداشته و در سرم فیزیولوژی استریل حل می کنیم . باید در نظر داشت که چون ، در تست آنتی بیوگرام میزان کدر بودن برای ما خیلی مهم است ، بنابراین در انتخاب مقدار نمونه باید دقت کنیم تا نمونه را بیشتر یا کمتر از نیم مک فارلند برنداریم . اگر میزان کدورت کمتر از نیم مکفارلند باشد ، مقداری دیگر از نمونه را در سرم فیزیولوژی استریل حل می کنیم و یا اگر میزان کدر بودن ، بیشتر از نیم مک فارلند باشد در این صورت باید مقداری سرم فیزیولوژی استریل اضافه کرد تا به کدورت مناسب و برابر با نیم مک فارلند برسیم.در آن هنگام برای کشت استفاده کردیم .اگر سوسپانسیون رقیق باشد قطر عدم رشد بزرگتر و اگر غلیظ تر از استاندارد باشد بدون اینکه حساسیت ارگانیزم تغییری کرده باشد هاله عدم رشد کمتری خواهیم گرفت

انجام آزمایش تعیین حساسیت به آنتی بیوتیک:
بعد از فرو بردن سواپ استریل در سوسپانسیون میکروبی اضافه محلول را با فشار دادن سواپ به کناره لوله, گرفته و سپس در سطح پلیت سه بار در حالت زاویه 60 درجه کشت چمنی دادیم سپس سواپ را دور قسمت داخلی پلیت چرخانده و سپس وارد محلول ضد عفونی کردیم سپس با استفاده از پنس دیسک هایی را که از یک ساعت قبل از فریزر بیرون آورده بودیم را در سطح محیط کشت قرار دادیم سپس با نوک پنس هر کدام از دیسک ها را در جای خود محکم کردیم پس از قرار دادن دیسک های آنتی بیوتیکی برای همه پلیت ها و انجام این عمل آنها را به مدت 24 ساعت در 37 درجه قرار دادیم سپس با استفاده از خط کش دقیق قطر هاله عدم رشد را بر حسب میلیمتر اندازه گرفته و با استفاده از جدول,میزان حساسیت باکتری را نسبت به آنتی بیوتیک به صورت حساس,نیمه حساس,و مقاوم گزارش می نماییم.